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聚丙烯酰胺凝胶低毒性替代材料研究

09-28

  聚丙烯酰胺凝胶低毒性替代材料研究_电子/电路_工程科技_专业资料。聚丙烯酰胺凝胶电泳以其低廉的分析成本、简单的操作、良好的重复性、较短的分析时间等优势,广泛应用于生物、医学、食品、农学等诸多学科领域蛋白质以及多肽类化合物的分离鉴定。球探体育,其分离机制是在电场的作用下,蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶所形成的网状结构中发生迁移,其迁移的距离与电泳条件以及

  目录 目录 第一章绪论……………………………………………………………..1 1.1丙烯酰胺及聚丙烯酰胺简介……………………………………………………..1 1.1.1丙烯酰胺生产方法………………………………………………………………2 1.1.2丙烯酰胺毒性研究………………………………………………………………3 1.2聚丙烯酰胺凝胶特性的研究……………………………………………………..4 1.3变性十二烷基硫酸钠.聚丙烯酰胺凝胶电泳简介………………………………5 1.4聚丙烯酰胺凝胶电泳液缓冲体系和凝胶浓度的选择…………………………..7 1.4.1电泳缓冲液的选择………………………………………………………………7 1.4.1.1pH值的选择……………………………………………………………………7 1.4.1.2离子强度的选择……………………………………………………………….7 1.4.2凝胶浓度的选择…………………………………………………………………7 1.5影响丙烯酰胺聚合的因素………………………………………………………..8 1.5.1单体与交联剂的浓度和配比……………………………………………………8 1.5.2引发剂与增速剂的选择与加入量………………………………………………8 1.5.3分子氧……………………………………………………………………………9 1.5.4环境温度…………………………………………………………………………9 1.6聚丙烯酰胺凝胶电泳后检测方法………………………………………………。9 1.6.1银染法…………………………………………………………………………..10 1.6.2考马斯亮蓝染色法…………………………………………………………….10 1.6.3荧光染色法…………………………………………………………………….1 1 1.7本论文的研究目的及意义………………………………………………………11 第二章对SDS.PAGE聚合过程的研究………………………………13 2.1引言………………………………………………………………………………………………………13 2.2实验材料与设备…………………………………………………………………13 2.2.1实验材料……………………………………………………………………….13 2.2.2实验设备…………………………………………………………………………14 2.3实验方法…………………………………………………………………………1 5 2.3.1利用EP管内的微缩反应监测聚合反应体系的温度变化…………………一15 2.3.2采用凝胶制备试剂盒制胶并电泳…………………………………………….16 V 万方数据 北京化工大学硕士学位论文 2.3.2.1蛋白BSA标准液的配制及变性……………………………………………16 2.3.2.2配制电泳缓冲液……………………………………………………………..16 2.3.2.3聚丙烯酰胺凝胶的制各………………………….…………………………..16 2.3.2.4准备电泳槽…………………………………一………………………………17 2.3.2.5电泳……………………………………………………………………………l 7 2.3.3染色与结果记录……………………………………………………………….17 2.4结果讨论…………………………………………………………………………18 2.5本章小结…………………………………………………………………………19 第三章N’N.二甲基丙烯酰胺聚合条件的优化………………………21 3.1引言……………………………………………………………………………….2l 3.2实验材料与设备…………………………………………………………………21 3.2.1实验材料…………………………………………………………………………21 3.2.2实验设备……………………………………………………………………….22 3.3实验方法…………………………………………………………………………22 3.3.1 TEMED加入量对DMA.Bis聚合反应体系温度变化的影响………………22 TEMED加入量对DMA:Bis--29:0.6聚合反应体系温度变化的影响…23 3.3.1.1 3.3.1.2 3.3.2.3 3.3.2 TEMED加入量对DMA:Bis=29:0.8聚合反应体系温度变化的影响…24 TEMED加入量对DMA:Bis=29:1.0聚合反应体系温度变化的影响…25 N’N.二甲基丙烯酰胺与N,N.甲叉丙烯酰胺的配比对电泳结果的影响……27 3.4结果讨论…………………………………………………………………………28 3.5本章小结…………………………………………………………………………29 第四章N_(2.羟乙基)丙烯酰胺聚合条件的优化…………………3 1 4.1引言………………………………………………………………………………………………………。3 l 4.2实验材料与设备…………………………………………………………………3l 4.2.1实验材料………………………………………………………………………一3l 4.2.2实验设备……………………………………………………………………….32 4.3实验方法…………………………………………………………………………32 4.3.1TEMED加入量对HEA-Bis聚合反应体系温度变化的影响:……………..32 4.3.1.1 4.3.1.2 4.3.1.3 TEMED加入量对HEA:Bis=29:0.6聚合反应体系温度变化的影响…32 TEMED加入量对HEA:Bis=29:O.8聚合反应体系温度变化的影响…34 TEMED加入量对HEA:Bis=29:1.0聚合反应体系温度变化的影响…35 VI 万方数据 目录 4.3.2 N.